中藥木香來源于菊科植物木香的干燥根，具“香氣蜜”的特性，是唐宋時(shí)期主要的舶來熏香奢侈品之一。在《神農(nóng)本草經(jīng)》、《新修本草》及《香譜》等典籍中記載，木香入藥用可“主邪氣，避毒疫瘟鬼，強(qiáng)志，主淋露……”，入香用可“療毒腫，消惡氣……”。現(xiàn)代研究表明，萜烯和內(nèi)酯組分是木香類藥材的核心藥效組分，其中又以木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯為主，在精油中具有明顯的富集效應(yīng)。目前，與木香類藥材相關(guān)的科學(xué)研究及應(yīng)用也多以木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯為主體進(jìn)行新型制劑的開發(fā)及藥理藥效學(xué)研究，尚未有科學(xué)研究闡釋其香用、藥用的物質(zhì)基礎(chǔ)關(guān)系，也未能充分體現(xiàn)木香傳統(tǒng)的香、藥兩用優(yōu)勢(shì)。
基于對(duì)木香精油質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究，本實(shí)驗(yàn)以木香精油為研究對(duì)象，通過感官評(píng)價(jià)、電子鼻、GC-MS，偏最小二乘法-判別分析（PLSDA）、主成分分析（PCA）等儀器方法檢測(cè)分析木香精油中的主要香氣物質(zhì)基礎(chǔ)，并根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)木香精油的旋光度、折光指數(shù)、相對(duì)密度和混溶度進(jìn)行測(cè)定。
一、材料與方法
01
原料與試劑
木香飲片、無水硫酸鈉、甲醇、乙醇、乙醚、蒸餾水（20℃時(shí)的折光指數(shù)為1.3330）。
02
儀器與設(shè)備
AIT-N1200型電子鼻、Agilent7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、AgilentGC-MSD工作站，ZDHW型調(diào)溫電熱套、萬分之一電子天平、BXG-2型圓盤旋光儀、WYA-2WAJ型阿貝折光儀。
03
木香精油的制備與處理
將木香飲片粉碎處理過2號(hào)篩，參考《中國藥典》2020年版IV部通則中揮發(fā)油測(cè)定法，置于揮發(fā)油提取裝置中，加入8倍量水，振搖混合，加熱提取8h，吸取油層，5000rpm離心5min，加入適量無水硫酸鈉，于冰箱靜置過夜后，吸取上層精油，并以4℃保存，各批次均平行制備3份精油。
將木香飲片提取精油后，按照以下方法進(jìn)行下一步處理：
香氣正常的木香精油樣品T1：取300μl木香精油，30℃水浴10min；
香氣損失的木香精油樣品T2：取300μl木香精油，70℃恒溫密閉水浴加熱72h，取出冷卻至室溫后，30℃水浴10min。
04
感官評(píng)價(jià)
吸取T1、T2樣品各20μl滴在試香紙上，評(píng)價(jià)人員嗅聞不同批次的T1、T2樣品，并參考標(biāo)準(zhǔn)GB/T12312-2012感官分析味覺敏感度的測(cè)定方法，采用成對(duì)比較檢驗(yàn)法，判斷樣品氣味的強(qiáng)弱，每對(duì)樣品共計(jì)評(píng)價(jià)3次，并對(duì)評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行單邊檢驗(yàn)，判斷樣品差異是否具有顯著性。
05
電子鼻檢測(cè)
分別取20μlT1、T2樣品于4ml頂空進(jìn)樣瓶中，30℃水浴25min后，采用AIT-N1200型電子鼻對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)條件為：氣體進(jìn)樣流量600ml/min，傳感器清洗時(shí)間120s，采樣時(shí)間間隔1s，測(cè)試時(shí)間60s，樣品平行測(cè)定3次。電子鼻傳感器對(duì)應(yīng)的敏感成分見表1。以采樣時(shí)間為橫坐標(biāo)，響應(yīng)信號(hào)值（G/G0）為縱坐標(biāo)，得到8根傳感器在60s內(nèi)的響應(yīng)值變化，取56-59s處穩(wěn)定曲線數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
06
GC-MS香氣成分定性分析
吸取20μl木香精油于2ml容量瓶中，用正己烷定容至刻度線，渦旋混勻，過0.45μm微孔濾膜，4℃下保存待檢。
二、結(jié)果與分析
01
感官評(píng)價(jià)結(jié)果
感官評(píng)價(jià)共計(jì)納入19位身體健康、不吸煙、不酗酒、嗅覺感受器正常的評(píng)價(jià)人員。評(píng)價(jià)人員在無異常氣味的潔凈實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，對(duì)T1、T2樣品香氣成分的強(qiáng)弱進(jìn)行兩兩比較。19位評(píng)價(jià)人員均認(rèn)為T1、T2樣品香氣強(qiáng)弱存在差異，其中14位評(píng)價(jià)人員三次評(píng)價(jià)后均認(rèn)為T1氣味強(qiáng)于T2，參考標(biāo)準(zhǔn)GBT12312-2012進(jìn)行單邊檢驗(yàn)，p≤0.05，表明經(jīng)處理后精油的香氣成分存在損失，即木香精油的香氣損失實(shí)驗(yàn)成功。
02
電子鼻檢測(cè)結(jié)果
采用WiMuster軟件進(jìn)行雷達(dá)圖的繪制與PCA分析。雷達(dá)圖表明木香精油氣味來源為：氮氧化合物、醇類、短鏈烷烴類等，見圖1A。PCA分析表明不同批次木香精油具有一定程度的相似性，經(jīng)處理后T1、T2樣品存在差異，但不顯著，見圖1B。為進(jìn)一步探究木香精油特殊香氣成分的可能化合物來源，將原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA14.1軟件，對(duì)不同批次T1、T2樣品進(jìn)行PLS-DA分析，并結(jié)合感官評(píng)價(jià)分析，將VIP>1傳感器所代表的敏感成分視作評(píng)價(jià)人員所感知的精油特殊香氣差異成分來源，見圖2，可知木香精油的香氣成分的主要來源為：醇、芳香成分（萜類、烯類、酯類等）、短鏈烷烴類，并采用GC-MS進(jìn)行進(jìn)一步的定性分析。
03
GC-MS分析結(jié)果
通過與NIST14.L數(shù)據(jù)庫進(jìn)行質(zhì)譜匹配，并在相同色譜條件下與Adams和NIST數(shù)據(jù)庫中記錄的保留指數(shù)值進(jìn)行比較，篩選T1、T2樣品差異成分，確定了木香精油香氣成分。
關(guān)鍵差異香氣成分見表2，總相對(duì)含量為37.72±3.24%，去氫木香內(nèi)酯相對(duì)含量（%）≥21.33%。
三、結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)通過加熱處理的方式建立了木香精油的香氣損失模型，并通過感官評(píng)價(jià)及電子鼻檢測(cè)驗(yàn)證該模型的成功。隨后采用GC-MS儀器將木香精油的香氣損失模型樣品與同批正常的木香精油樣品進(jìn)行了具體成分對(duì)比分析，從而得到木香精油的主要香氣物質(zhì)。
來源：感官科學(xué)與評(píng)定，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來源。文章封面及配圖來源;創(chuàng)客貼會(huì)員。
來源：感官科學(xué)與評(píng)定，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來源。文章封面及配圖來源;創(chuàng)客貼會(huì)員。
參考文獻(xiàn)：趙淋仙,徐純藝,周瑋玲,等.基于感官評(píng)價(jià)及電子鼻結(jié)合GC-MS技術(shù)的木香精油香氣成分分析[J].中藥與臨床,2023,14(06):12-16.提醒：文章僅供參考，如有不當(dāng)，歡迎留言指正和交流。且讀者不應(yīng)該在缺乏具體的專業(yè)建議的情況下，擅自根據(jù)文章內(nèi)容采取行動(dòng)，因此導(dǎo)致的損失，此公眾號(hào)運(yùn)營方不負(fù)責(zé)。如文章涉及侵權(quán)或不愿我平臺(tái)發(fā)布，請(qǐng)聯(lián)系處理。
